發(fā)布時間:2013-06-13 15:42:51
從自然界中得到的微生物菌種往往產(chǎn)值不高，達(dá)不到出產(chǎn)需求。因而，大家在知道和知道微生物特性的基礎(chǔ)上，應(yīng)用微生物遺傳變異及代謝調(diào)控理論，經(jīng)過操控微生物的成長代謝條件，格外是以物理或化學(xué)要素誘發(fā)微生物驟變而發(fā)生優(yōu)秀性狀，迸一步挑選出高產(chǎn)菌株。
分子生物學(xué)的開展、基因工程技能的應(yīng)用，為發(fā)酵工業(yè)供給了更為較好的育種手法。由此不只可以定向地進(jìn)步發(fā)酵產(chǎn)率，而且還可得到新的工程菌株，出產(chǎn)微生物不能發(fā)生的各種蛋門質(zhì)和肽類，如胰島素、攪擾紊等。
發(fā)酵下業(yè)運(yùn)用的微生物菌種，開始都是從自然界中別離挑選出來的。要從自然界找到咱們所需求的優(yōu)秀菌種，首要有必要把它們從許多的雜菌中別離出來，然后依據(jù)出產(chǎn)需求和菌種特性，選用各種不一樣的挑選辦法，選出功能杰出的純種。別離與挑選菌種的具體做法通常分為4個步驟，即樣品收集、增殖培育、純種別離和出產(chǎn)功能測定。
在自然界取得的樣品，是許多品種微生物的混雜物，通常選用平板劃線或平板稀釋法進(jìn)行純種別離。為了添加別離成功率，可經(jīng)過富集培育添加待別離菌的數(shù)最。即是運(yùn)用不一樣品種的微生物其成長繁衍對環(huán)境和養(yǎng)分需求的不一樣，如溫度、pH、滲透壓、氧氣、碳源、氮源等，人為操控這些條件，使之利于某類或某種微生物成長，而不利于其他品種微生物的生計(jì)，以到達(dá)使意圖菌種占優(yōu)勢，而得以疾速別離純化的意圖。這種辦法又被稱為施加選擇性壓力別離法。
操控培育時的氧氣，可將好氧和厭氧微生物分隔；在高溫下培育，可將嗜熱微生物和非嗜熱微生物分隔；操控不一樣的pH條件，可別離出嗜酸或嗜堿微生物；運(yùn)用高糖或高鹽的培育基進(jìn)行培育，可取得耐高滲透壓的微生物；控翩培育基的各種養(yǎng)分成分，均可使能運(yùn)用此種養(yǎng)分的微生物被富集，然后很多取得。
在別離培育基中也廣泛選用參加不一樣的抗生素或試劑來添加選擇性。如在別離放線菌和細(xì)菌時，可參加抗真菌抗生素；別離真菌時，可參加抗細(xì)菌抗生素。培育辦法可選用分批式富集培育（搖瓶培育）和恒化式富集培育（接連培育）兩種辦法。
分批式富集培育是指將富集培育物轉(zhuǎn)接到新的同一種培育基中，從頭樹立選擇性壓力，如此重復(fù)轉(zhuǎn)種幾回后，再取此富集培育物接種到固體培育基上，以取得單菌落。這種分批式富集培育中，轉(zhuǎn)種的時刻是要害應(yīng)在所需菌種占優(yōu)勢情況下轉(zhuǎn)種。
恒化式富集培育技能是經(jīng)過改動限制性基質(zhì)的濃度，來操控兩類不一樣菌株的比成長速率。因而可經(jīng)過改動稀釋速率進(jìn)行接連富集培育，取得所需求的菌種。用接連富集培育技能別離出來的菌種，格外合適用于接連發(fā)酵出產(chǎn)，而分批式富集培育鈍化辦法別離得到的菌株，在接連發(fā)酵出產(chǎn)中的體現(xiàn)很差。
接連富集培育辦法還可以用于別離習(xí)慣某種工業(yè)出產(chǎn)需求特性的菌株，如能習(xí)慣簡略培育基的菌種，這樣不只可以下降出產(chǎn)成本，且不易染菌。還可進(jìn)步別離溫度，有可以別離出耐高溫菌株，在出產(chǎn)中節(jié)省冷卻水。用接連富集培育辦法也可挑選出能共生的安穩(wěn)混合菌群。
固體培育基常用于別離各種酶發(fā)生菌，在固體選擇性培育基中參加酶效果的底物培育微生物，可以運(yùn)用此底物的酶發(fā)生菌得以成長，而且往往會在其菌落周圍構(gòu)成一通明圈。通明圈的巨細(xì)雖不能與酶生機(jī)的凹凸成正比，但可以作為菌種初篩的判別規(guī)范。像蛋白酶、脂肪酶、果膠酶、甘露聚糖酶、淀粉酶、纖維素酶等酶發(fā)生菌，都可用這個辦法進(jìn)行挑選。
本文參考《發(fā)酵工程原理與技術(shù)》一書。
常見問題
